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对此人们纷纷猜测蒙娜丽莎没有眉毛的原因，首先认为：原来画中人物是有眉毛的，达芬奇为了创作需要故意不画眉毛，因为画眉毛致使整个面部不协调，绘画中的“三庭五眼”受到破坏，影响美感，所以达芬奇没有画眉毛。
第二个原因就是画中人物原来有眉毛，只是油画经过长时间的放置，导致油画掉色脱落。有专家把《蒙娜丽莎》放大了数倍观察，发现蒙娜丽莎的左眼经放大之后，显示出其眉毛区域有细微的一笔，所以从逻辑上讲，蒙娜丽莎不是没有眉毛，而只不过眉毛只有细细的一笔而已。这幅画经过几百年的时间，这么淡淡的一笔眉毛已经掉色了。
第三个原因就是后人在修复的时候涂抹掉了，经过放大观察，发现眼睛周围的裂缝已经消失，这说明这幅画被后人修复过，可能在清洁和修复的过程中，眉毛被擦掉了。
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