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【地下黑作坊用病死猪肉腌制的腊肉往往含有大量的细菌,可利用“荧光素--荧光素酶生物发光法”对市场中腊肉含细菌多少进行检测:①将腊肉研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光】
1人问答
更新时间:2024-03-29
问题描述:

地下黑作坊用病死猪肉腌制的腊肉往往含有大量的细菌,可利用“荧光素--荧光素酶生物发光法”对市场中腊肉含细菌多少进行检测:

①将腊肉研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;

②记录发光强度并计算ATP含量;

③测算出细菌数量.

分析并回答下列问题:

(1)荧光素接受___提供的能量后就被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光.根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量,原因是发光强度与ATP含量成___(正比/反比);根据ATP含量进而测算出细菌数量的依据是:每个细菌细胞中ATP含量___.

(2)“荧光素--荧光素酶生物发光法”中涉及的能量转换是___;生物细胞中ATP的水解一般与___(吸能反应或放能反应)相联系.

(3)研究人员用不同条件处理荧光素酶后,测定酶浓度与发光强度如图所示.其中高浓度盐溶液经稀释后酶活性可以恢复,高温和Hg2+处理后酶活性不可恢复.若要节省荧光素酶的用量,可以使用___处理;Hg2+处理后酶活性降低可能是因为___.

李著信回答:
  (1)荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量.每个细菌细胞中ATP含量大致相同且相对稳定,故可根据ATP含量进而测算出细菌数量.   (2)“荧光素--荧光素酶生物发光法”中涉及的能量转换是化学能转变为光能;放能反应一般与ATP的合成相联系,吸能反应一般与ATP的水解相联系.   (3)因高浓度盐溶液经稀释后酶活性可以恢复,高温和Hg2+处理后酶活性不可恢复.故要节省荧光素酶的用量,可以使用Mg2+处理;Hg2+处理后酶活性降低可能是因为Hg2+破坏了酶的空间结构使酶变性.   故答案为:(1)ATP  正比  大致相同且相对稳定   (2)化学能→光能  吸能反应   (3)Mg2+   Hg2+破坏了酶的空间结构
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